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【益诺思药效】稳定高效 建模无忧!益诺思膀胱癌原位模型介绍
2026-06-02

膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一,其侵袭转移机制研究及新药开发,高度依赖能真实模拟人体肿瘤微环境的动物模型。然而,传统模型的两大痛点,长期困扰着科研人员:

 

  • 成模率低:即使是免疫健全的C57BL/6J小鼠,天然免疫清除作用也常导致肿瘤细胞难以在膀胱定植。

  • 重复性差:商用细胞系在传代中容易发生表型漂移,侵袭性下降,导致不同批次的实验结果千差万别。

益诺思建立了2株全新的高侵袭性MB49-Luc-1和MB49-Luc-2膀胱癌细胞,并基于此开发了优化的小鼠膀胱癌原位模型,将成模率一举提升至96%,为膀胱癌研究提供了强大的平台。

 

01 体内筛选出来的高侵袭性细胞

这个模型的核心,是经过“体内-体外联合筛选”的细胞——MB49-Luc-1和MB49-Luc-2。

与普通商业化MB49-Luc细胞不同,这两株细胞并非简单通过Transwell筛选获得,而是先让亲本细胞在C57BL/6J小鼠膀胱内经历一轮真实的体内“优胜劣汰”,筛选出那些能逃避免疫清除、成功定植并稳定生长的高适应性肿瘤。然后,再从这些肿瘤中分离出细胞,通过体外实验锁定侵袭能力最强的克隆,并传代10代以上,期间每3-5代分别进行荧光素酶表达、细胞增殖、STR鉴定等多参数表型稳定性验证,确保无漂移。

这2株细胞展现出极强的迁移和侵袭能力。Transwell实验(图1和图2)显示,其穿膜细胞数显著高于亲本细胞。

图1:不同MB49-Luc细胞株Transwell侵袭实验(20倍镜下结晶紫染色结果)

图2:Transwell侵袭实验穿膜细胞数比较

 

02 模型性能大幅提升

小鼠接受不同放射量(1-4Gy)的Co60辐照后接种MB49-Luc-1和接受2Gy放射量的Co60辐照后接种MB49-Luc-2,各项成瘤指标明显优于亲本细胞:

  • 肿瘤生长速度:活体荧光成像显示(图3和图4),MB49-Luc-1和MB49-Luc-2组从第6天起,荧光信号即持续快速增长,生长曲线斜率远高于同等辐照剂量的亲本组。

图3:小鼠不同辐照剂量下接种3株MB49-Luc细胞株的肿瘤生长曲线

图4:小鼠接种肿瘤细胞后的活体成像图

  • 最终肿瘤重量:如图5所示,MB49-Luc-1和MB49-Luc-2组在终点的平均肿瘤重量分别为275 mg和260 mg,而亲本MB49-Luc组仅35 mg,差异极为显著(P<0.01)。

图5:小鼠膀胱重量(含肿瘤)对比

  • 成模率:质的飞跃,在相同判定标准下,亲本MB49-Luc接种30只小鼠,23只存活小鼠中仅2只成功成模,成模率仅8.7%。而MB49-Luc-1接种30只小鼠,25只存活小鼠中有24只造模成功,成模率高达96%。MB49-Luc-2共接种20只,18只存活小鼠中有13只造模成功,造模成功率为72.2%。

 

03 建模方法优化

除了换用高性能细胞,这套建模方法在细节上也做了系统性优化,进一步提升了成功率:

  • 温和的免疫抑制:摒弃易导致小鼠衰竭的高剂量辐照,采用1-4 Gy低剂量Co60辐照,在接种前48h进行,在保留一定免疫微环境相关性的同时,为肿瘤细胞打开“免疫窗口期”。
  • 精准的膀胱预处理:使用稀盐酸短时(约1分钟)灌注膀胱,温和破坏膀胱内壁黏膜,暴露基底膜,为细胞黏附提供绝佳的“土壤”。灌注前后均用PBS冲洗,安全可控。
  • 延时注入技术:手术暴露膀胱后,沿外壁注射细胞悬液,注射后留针停留30分钟至1小时,给予细胞充分的贴壁时间,再拔出注射器,最大限度减少细胞漏液流失。
  • 可选的两步法建模:对于需要扩大规模的研究,该方法还支持两次植入。首次植入后,待肿瘤长成,取出肿瘤体外扩增,再次植入第二批小鼠。第二次植入无需再次全身辐照,极大简化了操作并降低了动物消耗。

 

04 应用前景:从机制研究到药物筛选的高效平台

这套由MB49-Luc-1和MB49-Luc-2细胞 + 优化建模方案构成的原位模型体系,兼具以下优势:

  • 高临床相关性:在免疫健全小鼠膀胱中原位生长,更好地还原了肿瘤-间质互作与免疫微环境。

  • 高稳定性与重复性:经过严格筛选的细胞株表型稳定,保证了批次间数据可比。

  • 可实时监测:Luciferase标记可实现活体成像,动态观察肿瘤生长和转移,无需分批处死。

该模型为研究膀胱癌的侵袭转移机制、筛选新型抗肿瘤药物、评估免疫疗法疗效等,提供了一个高时效、高可靠度的动物模型平台。在药物筛选中,该模型适合评估鼠源免疫检查点抑制剂,可真实模拟免疫健全微环境下的抗肿瘤免疫应答;对于ADC等靶向药物,则需确认其能交叉识别小鼠相应靶点,或使用鼠源替代版本;同时可用于吉西他滨、顺铂等化疗药物及溶瘤病毒的疗效验证,尤其适合需要免疫健全微环境的联合疗法评价。

益诺思药效学平台:益诺思药效学平台深耕行业多年,已构建起完善的新药药效学评价服务体系。平台依托经验丰富的专业技术团队、国际先进的实验设备仪器、品类齐全的细胞库与标准化体内疾病药效学模型,以成熟的体外+体内药理药效评价体系为核心,可从整体、细胞、分子及基因多维度,为客户提供全流程、定制化的新药药效学评价服务,全面加速客户新药研发项目的落地进程。

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